Se trata de un paciente de 34 años, con antecedentes de prostatitis tratado con antibióticos y varicocele subclínico intervenido 2 años atrás. Como información adicional, el paciente reporta espermograma con 15 millones de espermatozoides por centímetro hace 15 años, pero ha evolucionado hacia la azoospermia a partir de este año.

Presentó un cuadro de orquitis post- parotiditis hace 7 años y refiere atrofia testicular de manera progresiva. No hay ningún otro antecedente de importancia y reporta una vida sexual totalmente normal. Al examen físico llama la atención una atrofia testicular bilateral que permite simplemente encontrar un 25% del tamaño testicular normal; el cuadro clínico se interpreta como una atrofia testicular post-parotiditis. Se solicita dosificación de FSH, la cual muestra un nivel de 38.54UI/ml.

La biopsia testicular es realizada bajo anestesia local, con apertura transversal del escroto y exposición del testículo; se realiza apertura de túnica vaginal y se procede a la extracción de la biopsia testicular, de un tamaño aproximado de 0.5 ml; se realiza cierre con catgut cromado 3 ceros y sutura por planos; no se presenta ningún tipo de complicación postoperatoria.

En la muestra obtenida, llama la atención, que al aspecto macrocóspico del tejido testicular es más oscura de lo usual. Se envía biopsia testicular para patología que es reportada como arresto espermatocítico incompleto, hiperplasia de células de Leydig y atrofia focal.

Se recibe en el laboratorio un corte de testículo derecho, que se deposita en una de caja de Petri de 35 x 10 mm (Falcon), que contenía HTF (Irvine, Sci; USA) al 4% del Albúmina humana (Irvine. Sci; USA) pre equilibrada al 5% de CO2 Y 37oC.

Se realizó microdisección del tejido testicular con agujas de insulina y/o bisturí. Después de separar todos los tubos seminíferos, se observó la presencia de células espermáticas, encontrándose entre 1 a 2 espermatozoides móviles por campo. Luego se mantuvo este procesado durante dos horas en incubadora de CO2 a 37oC. Posteriormente, se tomó el sobrenadante; se centrifugó por 10 minutos a 250g, desechando el sobrenadante y dejando un pellet entre 250 a 500 microlitros se procedió a realizar la mezcla en relación 1:1 con medio de congelación (Ackerman). Esta dilución se mantuvo por 15 minutos a 37oC y se procedió al llenamiento de las pajillas de 0.25cc (tres pajillas), para realizar posteriormente el procedimiento de congelación.

La esposa de 29 años de edad sin antecedentes de importancia; con niveles al tercer día del ciclo de FSH de 4,28 mUI/ml; LH de 3.26 mUI/ml; Estradiol de 73.35 pg/ml. Se inicio esquema de inducción de ovulación para técnica de reproducción asistida (ICSI), utilizando un esquema de protocolo largo con análogos de la GnRH (Acetato de leuprolide de 3.75 mg), aplicado en la fase lutea del ciclo precedente, una vez se confirmó que los niveles de estradiol se encontraban por debajo de 50 pg/ml comenzamos la inducción de ovulación mediante FSH recombinante, aplicando un total de 22 ampollas.

Una vez se observaron folículos con tamaño superior a 18 mm, se procedió a la colocación de gonadotropina coriónica humana 10.000 UI y se realizó la aspiración folicular vía transvaginal con Ecografo marca ALOKA con transductor 7.5 Mhz; bajo anestesia general. De este procedimiento se obtuvieron un total de 5 oocitos. Las células de la granulosa fueron removidas 3 horas después de la aspiración en una solución tamponada de hialuronidasa a 80 UI/ml (Sigma, USA). Se observan cinco oocitos en Metafase II, los cuales fueron microinyectados.

La muestra de espermatozoides testiculares fue descongelada (3 pajillas), lavada una vez, resuspendida en 1 ml de medio tamponado con HEPES y mantenida a 37oC hasta el momento de ser empleada. Al no observar ningún espermatozoide móvil, se realizó una prueba de vitalidad con Eosina (OMS, 1992), y se detectaron un 37% de gametos con adecuada integridad de membrana.

En la placa de ICSI (Beckton Dickinson, USA), se dispusieron las siguientes gotas:

Cuatro gotas de medio tamponado, dos gotas de Polivinilpirrolidona – PVP (Irvine Scientific, USA), una gota de suspensión de espermatozoides, una gota de solución hiposmótica (OMS).

Por medio de micromanipulación se seleccionaron espermatozoides de morfología normal y se transfirieron a la gota de solución hipo-osmótica, observandolos uno a uno; aquellos donde fue evidente una reacción positiva se transfirieron a una de las gotas PVP. Para procedimiento de ICSI se empleo una pipeta de microinyección con un diámetro interno de 5 – 7 um y se realizó de acuerdo a la técnica descrita por Van Steirteghem12.

La fertilización se observó a las 16 horas de la microinyección, en la cual se apreciaba la presencia de dos pronúcleos en cuatro ovocitos. La transferencia de tres embriones y un cigoto fue llevada a cabo a las 48 horas del ICSI.

La paciente se somete a dosificación de Beta HCG cuantitativa los días 10, 12 y 14 post-transferencia, las cuales fueron de 42.8, 119 y 393 UI. respectivamente.

Se realiza ecografia transvaginal a la sexta semana de embarazo, observándose embriocardia positiva con longitud cefalocaudal embrionaria de 1.6 cm.

El bebé nació el 24 de marzo de 1999, Sexo: Masculino, Peso 4.000 gr., Estatura 53 cm, 38 semanas y media por cesárea sin ninguna complicación.